原官網的常見問題都先搬到這分類底下
P450-Glo CYP1A2 Induction and Inhibition Assay可否用再3D-culture system,做HTS藥物篩檢?
回覆:
可以,P450-Glo的substrate皆為細胞滲透性,可直接取培養液做檢測,細胞組織還可搭配下游裂解性試劑如CellTiter-GloR 3D(#G7570)做多功分析。
回覆:
並不建議使用這樣的方式哦。
回覆:
因為bacteriology中,在transformated cell中加入carrier cells的作用,可增加細胞裂解的效果,及冷光酶萃取的穩定性.
請問使用ProteaseMAX™ Surfactant, Trypsin Enhancer,protocol建議用50mM Ammonium bicarbonate回溶,但手邊只有Triethylammonium bicarbonate,是否也可使用?
回覆:
一般來說Triethylammonium bicarbonate是用在 isobaric labeling上,Isobaric tags for relative and absolute quantitation (iTRAQ),Promega原廠沒有測試過,但outside researchers有應用過,結果是可行的。
Oligo Annealing Buffer的用處?能否提供配方?
回覆:
The Oligo Annealing Buffer (C838A) composition is as follows:
60mM Tris-HCl (pH 7.9)
1.5M NaCl
60mM MgCl2
10mM DTT
pmirGLO(E1330)中提供的Oligo Annealing Buffer,是為了在annealing步驟時,避免oligonucleotide發生自行折疊。
coelenterazine substrate可否用在Gaussia luciferase & Metridia luciferase(MetLuc)?
回覆:
產品的資訊並沒有提到可通用在非Renilla luciferase的應用,但有找到文章寫到這兩種冷光酶都使用coelenterazine作為substrate,請參考以下連結:
MetLuc:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC2577724/
Gaussia:https://pubs.acs.org/doi/10.1021/acs.bioconjchem.6b00112
其偵測mycoplasma的相關產品?
回覆:
目前公司僅提供人類細胞基因型鑑定的服務,是利用STR分析方法鑑定人類來源細胞株。
1.太鼎代理的ABM PCR Mycoplasma的方式偵測 。
2.騰達行代理的Lonza MycoAlert™ Mycoplasma Detection Kit是冷光的方式。
3.勁因代理USBIological的Mycoplasma BioAssay™ ELISA Kit (Human) 是以ELISA的方式偵測。
4. Biontex的: MycoSPY 5.BI的產品: https://www.bioind.com/ez-pcr-mycoplasma-test-kit/
lentivirus vector transform with HB101可不可行?
目前有找到paper是E. coli Stbl3 is okay, and the E. col iStbl3 is a derivative of E. coli HB101.
回覆:
HB101 recA– mutation (minimizes recombination events). HB101可以for lentivirus plasmid transformation;XL-1 Blue也可以。需要注意的地方是plasmid 要帶有一個Gateway cassette, 包含了ccdB gene,ccdB是一個toxic protein,致死基因來著~ ccdB makes cloning easier by selecting against vectors that did not tache up customer’s insert. 因此 ccdB survival strain is necessary。如果clone成功的話,destination的ccdB會被一個基因替換掉,而最終產物將不攜帶ccdB基因,而生成colony。反之,空載體攜帶ccdB或E.coli攜帶ccdB的話,將不能生長。
回覆:
如果是POP7 可以先嘗試POP7 specific file first,且要把panel的5改成4,因為GM3.7無法辨認Pentas。
回覆:
原廠建議GenePrint10 的話可以用 GM-ID可以適用GM3.7版本。
客戶在自己的primer後面加了20-30個mer 的一個特定的序列,PCR用promega的pfu 有時候可以有時候PCR不OK,想P的長度是3-4K,想問有無其他polymerase可以替代?ex.M4021 long PCR master mix~~
回覆:
目前市場上有KOD enzyme-百力代理,正確率>pfu 14X;>tag 82X ; 效率 >pfu 5X ;耐熱 >pfu2X >tag 8X。 而且可以clone 12K gDNA. 7K cDNA, 21K phage DNA, 也適用GC-rich。 另一個更強的是Thermo: DyNAzymeII 也是取代pfu ,1.5kb/min(Pfu 500bp /min),且準確率更高。
請問兩套Assays可否做多功分析?
回覆:
可以的,但是Caspase-Glo® 3/7含有high reducing agent(DTT),會增加來自RealTime-Glo的background,要加NanoLuc inhibitor,或是再加入Caspase-Glo® 3/7 reagent後一小時內讀Caspase-Glo® 3/7的訊號(DTT需要一段時間消耗NanoLuc substrate),或是在加Caspase-Glo® 3/7 reagent前remove medium。
回覆:
可以的,原廠有測試過,適用於Gram-negative (如: E. coli) 與Gram-positive菌株。
GSH-Glo™ Glutathione Assay有無建議的Tissue sample 處理方式?可否用在果蠅?
回覆:
GSH-Glo™ Glutathione Assay可用在Cells, Tissue Extracts, Whole Blood and Erythrocyte Lysate,如需要處理Tissue sample時,不能含有DTT(會降低signal),可用TCEP代替。原廠則沒有測式在果蠅樣本。
回覆:
其產品濃度: 800U/ml,
dilute 2µl of this solution into 10ml of PBS + 1% BSA (1:5,000 dilution)