Apoptosis Assays

Apoptosis Assays

            一般在研究細胞死亡機制上(計畫性死亡，Programmed cell death，PCD)，常被討論的是Apoptosis、Necrosis及是否有呈現發炎(Inflammation)相關反應。瀕死細胞依照其不同表徵，相關Biomarker在細胞中表現量的改變，可幫助研究者釐清細胞對外在環境(病原性微生物感染、環境因子…等)或是毒物(藥物)的刺激後，是否引起免疫反應，甚至導致細胞死亡。

           Apoptosis發生時，可依照細胞型態及特定調控因子的改變，分成早期凋亡及晚期凋亡(二級壞死，Secondary necrosis )，不同時期的特徵不同，包括:

• 磷脂絲氨酸(Phosphatidylserine，PS) 從細胞膜內側翻轉到外側
• 細胞內的Caspase被活化，在細胞中剪切許多的蛋白受質，造成細胞失衡，使具修補功能的酵素喪失功能
• 染色質和片段化細胞質的濃縮，染色質DNA降解成50-300kb的大片段，再降解成更小的DNA片段
• 細胞收縮、産生細胞質液泡、形成Apoptotic bodies…等，這些Apoptotic bodies會被鄰近細胞吞噬。

Apoptosis通常不會，或只伴隨輕微的免疫反應，不會發生Inflammation，也不影響周遭正常細胞的生長。了解Apoptosis MOA可正確選擇Biomarker，來幫助研究者釐清其發生過程。(更詳細解說請參考第33期勁報)

 Immunogenic Cell Death(ICD)

近幾年來，細胞死亡機制一直是各種藥物、一才開發不可缺少的研究之一，除了上述的Apoptosis介紹外，還有另一種是與免疫反應較為相關的細胞死亡機制: Immunogenic Cell Death(ICD)

ICD研究主要與癌症治療相關，已知化療後的癌細胞死亡會使腫瘤環境中DAMP增加(ATP、HMGB1蛋白…等)，並促使免疫細胞的發炎反應，增加癌症治療的效果，此過程被就被稱作為ICD。其中ATP又被稱作為Extracellular ATP(eATP)，與HMGB1同時被認為是ICD的重要Biomarker。

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