Infectious Disease Bioassays

近代醫學對於疫苗的發展可謂是越來越倚重,已知宿主可通過疫苗接種或病毒感染後,經由免疫系統的機制使體內產生中和性抗體(Neutralizing Antibody, nAb),nAb可辨認病毒表面的抗原,並阻斷病毒顆粒進入宿主的細胞中,以此來提供抗病毒的免疫力。

 

然而,除了nAb的中和能力外,研究人員最近更加關注免疫系細胞表面的Fc class受體,這些受體是ADCC免疫機制不可或缺的一部分,帶有ADCC活性的nAb可藉由Fc region與免疫細胞結合,使免疫細胞(E.g., NK細胞) 進一步辨認出受病毒感染的細胞,並加以毒殺。通過此種方式,nAb不僅是中和病毒顆粒,還能夠消除宿主體內受感染的細胞,提供更高的免疫保護力。

 

而在各種疫苗開發的過程上,ADCC相關的免疫機制活性,都是評估其疫苗有效力的重要檢測項目。Promega ADCC Reporter Bioassay提供操作快速、便利且準確的In vitro ADCC檢測方式,包含Human以及Mouse model,且可應用於血清樣本,進行nAb MOA的檢測。

 

HSV疫苗開發應用

HSV疫苗(HSV-2 ΔgD)的小鼠取其血清,並用Mouse FcγRIV以及FcγRIII ADCC Reporter Bioassays進行ADCC活性檢測。(Ctrl: Fc receptor KO mice)

Ref: Petro, Christopher D., et al. (2016) HSV-2 ΔgD elicits FcγR-effector antibodies that protect against clinical isolates. JCI insight 1.12.

 

流感疫苗開發應用

 

Mini HA immunogens後取其血清,並用Mouse FcγRIV ADCC Reporter Bioassay檢測ADCC的活性。(bnAbs: Broadly neutralizing antibodies)

Ref: Impagliazzo, Antonietta, et al. (2015) A stable trimeric influenza hemagglutinin stem as a broadly protective immunogen. Science 349.6254: 1301-1306.

 

SARS-CoV-2 疫苗開發

♦SARS-CoV-2 ADCC Reporter Assay

Promega reporter ADCC bioassay在市場上的品質有口皆碑,最新推出SARS-CoV-2 ADCC Reporter Assay,只需將待測抗體加入此Bioassay系統中,便可快速檢測出其是否有ADCC的活性。

 

選擇Human ADCC 反應最主要的FcγR Reporter: FcγRIIIa的reporter effector cells,並搭配表現SARS-CoV-2 Spike (S) protein的target cells,可針對抗S protein 抗體快速的檢測其是否有ADCC/ADCP activity。

 

PBMC ADCC Reporter Assay

選用ADCC-qualified PBMCs來建立此PBMC ADCC Reporter Assay,搭配可穩定表現SARS-CoV-2 Spike (S) protein與HaloTag®-HiBiT protein的Target cell,可應用於抗體ADCC 活性檢測的Primary cell ADCC killing assay。

 

當抗體藥物成功引起PBMCs的ASCC反應後,便會將Target cell 毒殺,進而釋放出細胞內的HaloTag®-HiBiT protein,就可加入NanoGlo® HiBiT Extracellular Detection Reagent來監測Target cell killing的狀況。

 

 

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Human ADCC Bioassays

ADCC Reporter Bioassay (FcγRIIIa-V158)

ADCC Reporter Bioassay (FcγRIIIa-F158)

SARS-CoV-2 ADCC Reporter Assay
SARS-CoV-2 PBMC ADCC Assay

Mouse ADCC Bioassays

Mouse FcγRIV ADCC Reporter Bioassay

Mouse FcγRIII ADCC Reporter Bioassay

Human ADCP Bioassays

FcγRIIa-H ADCP Reporter Bioassay

FcγRIIa-R ADCP Reporter Bioassay

FcγRI ADCP Reporter Bioassay

ADCP Reporter Bioassay (THP-1)