Immunoassays
在生物醫學與細胞分子研究領域中,精確且高靈敏度的蛋白質定量技術對於解析細胞訊號傳導、疾病機轉以及藥物作用機制皆扮演關鍵角色。傳統的酵素免疫分析(ELISA)雖為廣泛應用的標準方法,然而其操作流程繁瑣、需多次洗滌與長時間孵育,常限制了在時間敏感性研究或高通量實驗中的應用效率。為回應現代實驗對於簡便、高通量且具即時性的蛋白檢測技術之需求,Promega 公司開發了 Lumit® Immunoassays,一種基於NanoBiT® binary luciferase complementation系統的創新型免疫分析平台。
Lumit® Immunoassay (NanoBiT®)
Lumit® Immunoassay是一種基於NanoLuc® Binary Technology (NanoBiT®) 的新型免疫檢測方法,它可以直接在培養的細胞中進行檢測,並且具有寬廣的檢測動態範圍和高度的靈敏度。
技術原理:
在 Lumit® Immunoassay中,抗體分別用NanoBiT®的LgBiT和SmBiT進行標記。當抗體與分析物結合後,兩個抗體接近,從而使SmBiT和LgBiT組成有活性的NanoBiT®冷光酶,並產生冷光訊號。與ELISA相比,這種方法不需要複雜的洗滌過程,可在培養的細胞中直接進行發光檢測,檢測的動態範圍廣,最短可在30 分鐘內完成實驗流程,對於高通量篩選和大規模蛋白質檢測非常有用,應用上可大致分為定量與檢測交互作用兩種。
操作流程:
產品特色:
- 簡單的一步式同質反應流程
✓ 無需洗滌步驟
✓ 無需封閉(Blocking)處理 - 可偵測的分析物存在於以下樣本中:
✓ 緩衝液
✓ 細胞培養上清液
✓ 細胞裂解液 - 可使用一般微量盤式冷光儀進行訊號偵測
產品技術優勢:
- 簡單的「加、混、測」(Add-and-read)操作流程,無需洗滌步驟
• 操作時間短、結果快速,且減少人工操作時間
• 無需將樣本固定於盤子、磁珠或其他固相介質上
• 可直接於細胞培養板中進行分析物測定
• 具高靈敏度與寬廣動態範圍的發光檢測
• 可使用一般微量盤式冷光儀進行偵測
• 專一性高,背景訊號低
• 易於自動化,並相容於高通量篩選(適用於 96-Well與384-Well)
Lumit®與傳統免疫分析的比較
Lumit® Immunoassays為快速、可直接於微孔盤中進行的「加、混、測」(Add-and-read)型檢測方法,無需洗滌步驟。相較於操作繁瑣的傳統方法,例如 ELISA或Western blot,Lumit®提供了一種高效率且簡化流程的替代方案。
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