Cell Viability & Proliferation Assays

檢測細胞活性的目的，除了在進行細胞實驗的過程中，要確認細胞數量外，還要掌握細胞存活的狀態，並更進一步判斷實驗變因(E.g. Drug treatment)造成的效果。市面上的細胞活性檢測方式/試劑眾多，使用者為了選擇最合適的方式，常常在Biomarker、操作流程、細胞培養條件、檢測方式…等，各種因素中做考量。

Promega提供品質穩定，且種類齊全的Cell Viability Assays，操作便利之外，也很有彈性，囊括各種常見Biomarker，給使用者最全面的選擇!

CellTiter-Glo® Assay

是靈敏度最高的細胞型活性檢測試劑，因此特別適合用於原代細胞（primary cells）相關研究。本試劑的突出特點包括：

操作簡便快速
數據再現性佳（1536 -well plate, Z' 因子 > 0.63）
極寬廣的線性測定範圍（10–50,000 個細胞）。

檢測原理

本試劑基於 ATP 依賴性冷光酶反應，藉由量測細胞內 ATP 含量來反映細胞的活性。Ultra-Glo™ Luciferase催化luciferin並釋放光訊號。該冷光訊號可透過冷光儀或 CCD 相機進行量測，其強度與活細胞數量呈正比。試劑直接加入細胞後即可裂解細胞並啟動反應。

寬廣的檢測線性

產品特性

CellTiter-Glo® 2.0 Assay

沿用原版 CellTiter-Glo® Assay 以 ATP 作為細胞活性指標的檢測化學原理，並在儲存便利性上進行改良，使導入更加容易。本試劑以單一即用型試劑形式提供：可於 4°C 儲存長達 1 個月（活性保留 >90%），或於室溫保存 1 週（活性保留 >85%）。試劑設計適用於多孔盤格式，非常適合自動化高通量篩選（HTS）、細胞增殖及細胞毒性試驗。在 384 孔盤格式下，加入試劑 10 分鐘內即可偵測到每孔最少 15 個細胞。

試劑的操作流程為將單一試劑（CellTiter-Glo® 2.0 Reagent）直接加入含血清培養基中培養的細胞，無需洗細胞、移除培養基或多步驟移液操作。「加入—混合—量測」的操作格式可裂解細胞並產生與 ATP 含量成正比的冷光訊號，而 ATP 量與培養物中的細胞數量直接相關。

穩定的長效冷光訊號

CellTiter-Glo® 2.0 Assay 產生「持續發光型（glow-type）」冷光訊號，半衰期通常超過 3 小時（視細胞種類及培養基而定）。

產品特性

CellTiter-Glo® 3D Assay

是 CellTiter-Glo® 的改良配方，在冷光法 ATP 偵測的基礎上，提供更有效的細胞裂解能力。「加入—混合—讀取」的操作流程搭配單組分液態格式，使本試劑成為量測 3D microtissues活性的簡便實用工具。將試劑直接加入細胞並反應 30 分鐘後，即可偵測到穩定的冷光訊號，訊號半衰期超過 4 小時。

以 3D 培養模型評估的細胞，通常能提供比傳統 2D 格式更具生理相關性的數據。因此，業界需要專門針對 3D microtissues進行驗證的便利且有效的檢測試劑。CellTiter-Glo® 3D 是一款冷光法 ATP 偵測試劑，採用經優化的操作流程與改良配方，專為量測 3D microtissues的細胞活性而設計。本試劑為單組分液態試劑，具有強效的裂解能力與高 ATP 回收率，可用於多種 3D 培養模型中微組織的活性量測，包括非細胞外基質依賴型（如懸滴培養，hanging drop）、細胞外基質依賴型（如 Matrigel™），以及合成支架型（如 Alvetex™）。

3D microtissues應用

冷光系統更適合用於3D culture 檢測

產品特性

包裝與貨號

Cat. #	Size
GC1000	100 assays
GC1002	500 assays
GC1001	1,000 assays

RealTime-Glo™ MT Cell Viability Assay 是一種非裂解性、均質冷光法檢測試劑，可透過測量細胞的還原能力（即細胞代謝活性，MT）即時定量培養物中的活細胞數量。試劑對細胞無毒，穩定性可維持長達 72 小時，無需洗細胞、移除培養基或額外添加試劑即可完成檢測。相較於同樣以細胞還原能力為基礎的比色法或螢光法活性試劑，本冷光法試劑具有更高的訊雜比與靈敏度，且所需時間更短。試劑亦相容自動化及高通量操作流程。

使用時，將 NanoLuc® 螢光素酶蛋白感應器及可穿透細胞膜的 pro-furimazine 前驅受質一同加入培養中的細胞。活細胞會將此專有前驅受質還原，生成可供 NanoLuc® 螢光素酶作用的受質；該受質隨即擴散至胞外培養基中，迅速被 NanoLuc® 酶催化，產生冷光訊號。訊號強度與活細胞數量呈正相關，因此本試劑特別適合細胞毒性研究。即時偵測可於細胞培養初始時、加入測試化合物時，或任何需要量測細胞活性的時間點加入試劑後進行。

試劑原理

即時動態偵測與多功分析: 即時監測細胞活性以判定毒性發生時間點；分析藥物效價與療效的時間變化；分析不同條件下的細胞生長差異；可與其他試劑進行多重檢測(multiplexing)。

產品特性表

CellTiter-Fluor™ Assay 是一種螢光法細胞活性檢測試劑。由於檢測過程中細胞保持完整，本試劑特別適合多重檢測應用。此試劑常用於數據標準化，即補償各孔或各盤間的差異。CellTiter-Fluor™ Assay 亦非常適合自動化操作。由於所偵測的標記不受細胞還原能力變化的影響，本試劑提供了一種與其他活性檢測方法正交（orthogonal）的評估方式，可在同一孔內與其他試劑同時進行檢測。

應用領域

細胞活性檢測
細胞毒性評估
可與其他細胞型試劑進行多重檢測（multiplexing）

檢測原理

本試劑的原理基於偵測一種保守性組成型蛋白酶活性，即「活細胞蛋白酶（live-cell protease）」，此酶活性僅存在於活細胞中。檢測時使用可穿透細胞膜的前螢光受質胜肽 glycylphenylalanyl-aminofluorocoumarin（GF-AFC），

數據可靠

該受質在細胞內被轉化為螢光產物 AFC。所產生的螢光訊號與細胞活性呈正比，並與其他活性檢測方法（如 ATP 量測或還原等價物量測）具有良好的相關性。

產品特性

CellTiter 96® AQueous One Solution Assay（MTS）採用呈色法原理，用於定量活細胞數量，適用於細胞活性、細胞增殖之測定，亦可間接評估細胞毒性。相較於 MTT 試劑，本試劑的一步驟操作設計具有一項顯著優勢：MTS 還原產物 formazan 可溶於水，因此無需使用有機溶劑進行萃取步驟。此外，有別於傳統比色法試劑，MTS 試劑亦可應用於血液淋巴球的檢測。試劑在 4°C 條件下的儲存穩定性也優於傳統試劑。

檢測原理 MTS 細胞活性偵測的原理，是利用代謝活性細胞將四唑鹽 MTS 還原為可溶於水的 formazan 染料。試劑中另含電子傳遞試劑（ETR）——苯嗪乙硫酸鹽（PES）。PES 在細胞內由 NADH 或 NADPH 等還原等價物還原後，於胞外進一步將 MTS 還原為深色 formazan。formazan 在 490 nm 的吸光值可直接於 96 孔盤中讀取，無需額外處理步驟。讀值與培養物中的活細胞數量呈正比。

MTS vs MTT

產品特性

CellTiter-Blue® Assay 是一種螢光法細胞型試劑，用於檢測細胞活性、細胞增殖及細胞毒性。相較於同類型的 resazurin 試劑，本試劑所使用的 resazurin 純度更高，且對細胞無毒，因此可彈性調整反應時間。本試劑可與其他細胞型試劑（例如 Apo-ONE® Homogeneous Caspase-3/7 Assay）在同一批細胞上同時進行多重檢測（multiplexing）。

應用領域

細胞活性檢測
細胞增殖分析
細胞毒性評估
多重檢測（multiplexing）

檢測原理

細胞活性的偵測基於藍色染料 resazurin，代謝活性細胞可在胞內將其還原為粉紅色螢光產物 resorufin。試劑可直接加入培養基中，無需額外處理。resorufin 的生成可透過螢光計（建議使用，靈敏度最高，激發波長 560 nm／偵測波長 590 nm）或分光光度計（ELISA reader，570 nm）進行偵測。