Transfection Systems

Transfection Systems

     以非病毒感染的方法將核酸插入真核細胞的方法被稱為轉染作用(Transfection)。這些方法的原理包括利用不同的化學，陽離子脂質體或物理法等。而基因轉染技術對於研究基因在細胞中所扮演的角色是不可或缺的重要工具。為了讓轉染的DNA可以穩定且長時間表現因此報導基因系統(Reporter gene system)及各式篩選方法被廣泛的應用在transfection。藉著分析報導基因技術和transfection試劑兩者的結合，提供分析哺乳細胞promoter / enhancer序列，轉錄因子丶mRNA processing蛋白質與蛋白質間的作用，蛋白質轉譯或基因重組等相關研究。

     概括來說，transfection主要是中和或消除外來分子的負電荷(例如：DNA或RNA是磷酸有骨架)，使之易於吸附到帶負電荷的細胞膜。化學性試劑Chemical Reagent，如Calcium phosphate，DEAE-dextran丶cationic lipid-based reagent中和甚而生成正電荷覆蓋外來分子，這些方法讓DNA和transfection  reagent 形成複合物，使其容易穿過細胞膜，特別是當脂質中有“fusogenic”融合的成份，可大大的提高融合至細胞磷脂雙層的機會，讓DNA更易穿過細胞膜。物理性方法(physical methods)例如微量注射(microinjection)或電穿孔(electroporation)直接穿刺細胞膜將DNA直接送入細胞質。