qPCR and RT-qPCR

Dye-Based Real-Time qPCR

BYBR Green I Dye直接取代 SYBR Green I 所有應用

分別偵測SYBR Green I 及專利GoTaq^® qPCR Master Mix與不同濃度的dsDNA，實驗結果顯示GoTaq^® qPCR Master Mix可相容SYBR Green I。

GoTaq^® qPCR Master Mix

• “熱啟動抗體”技術(Hot-Start Tech)抑制非特異性的常溫增幅活性
• 專利高濃度螢光物質，使用簡便，僅需添加樣本，引子及無菌水

優越靈敏度:
不同稀釋濃度之GAPDH作為偵測起始樣本，同步比較GoTaqR qPCR Master Mix及A牌產品。結果發現GoTaqR qPCR Master Mix之Cq (Ct)較A牌快約多達3個cycles。
GoTaqR qPCR shows significantly higher fluorescence and earlier Cq at all template levels.

GoTaq^® 1-Step RT-qPCR System

產品特色

• 混合樣本和試劑即可上機偵測
• 試劑與各大廠牌機器設定皆相容
• 減少操作流程及耗材使用量
• 結合GoScript ^RT與GoTaq qPCR試劑優點，效率優，靈敏度佳！

步驟簡單，RT-qPCR一管搞定 !

GoTaq^®  2-Step RT-qPCR System

兩步法RT-qPCR可用於RNA定量•透過GoScript™反轉錄進行CDNA合成，並

使用GoTaq®qPCR Master Mix進行系統和定量。

其試劑盒含所有試劑：

2X GoTaq®qPCR Master Mix, GoScript™ Reverse Transcriptase,

5X GoScript™ Reaction Buffer, PCR Nucleotide Mix, Oligo dT Primer, Random Primers, Recombinant RNasin Ribonuclease Inhibitor, CXR Reference Dye, MgCl2 and Nuclease-Free Water.

Hydrolysis Probe-based(螢光探針)

Hydrolysis(TaqMan) Probe-Fluorogenic5' Nuclease Assay

利用 PCR 產物的序列來設計一段互補的核酸探針，並在探針的兩端結合上兩能階相差甚多的螢光物質，稱為Reporter及Quencher，利用FRET(Fluorescence resonance energy transfer)螢光共振能量轉移原理使探針在與PCR產物結合後，造成散發光(emission light)波長的改變，若probe在游離態時，由於Reporter及Quencher之交互遮蔽作用並不發光的，當DNA被複製時，利用DNA polymerase 5’端外切酶能力，將螢光標定probe水解後，Quencher無法抑制reporter，他們倆個一分開，reporter就會發光，隨著cycle數增加，螢光值上升，然後就可以偵測Ct值。

Probe-Based Real-Time qPCR

qPCR: GoTaq Probe qPCR Master Mix

(Ready-To-Use Mix內含穩定2X Master Mix及GoTaq® Hot Start Polymerase, MgCl₂, dNTPs and a proprietary reaction buffer.此Master Mix附單管CXR reference dye)

一步RT-qPCR: GoTaq Probe 1-step RT-qPCR System

(內含單管GoScript™ Reverse Transcriptase與GoTaq® Probe qPCR Master Mix。單管操作反應，結合了RNA轉cDNA的合成與核酸增幅與定量)

產品特色：

1. 經由偵測水解探針釋放的螢光訊號,達到即時定量的效果(Hydrolysis Probe Detection)
2. 完整之2X Master Mix,簡化qPCR的實驗流程
3. 有結合Go Script^TM Reverse Transcriptase, 單步驟或雙步驟完成RT-qPCR整套流程之包裝可選擇
4. 結合快速的熱啟動抗體技術(Antibody-mediated Hot-Start Tech)，可於室溫操作
5. 耐受性佳，抵抗PCR過程中之潛在抑制物
6. 廣泛適合各種real-time PCR機型,且皆可執行Standard或Fast cycling program

優點：

靈敏、耐受性佳、高效、功能健全、品質保證

產品應用：

• 基因表現分析：Microarray、相對定量、ChIP、Copy number測定
• 特定序列偵測及定量：病原體偵測、基因改造生物(GMO)分析、品保、鑑識
• 基因分型：基因多型性SNP分析、Allelic discrimination、DNA甲基化分析
• 螢光偵測：DNA/RNA定量、蛋白質穩定度測定

兩步RT-qPCR: GoTaq Probe 2-step RT-qPCR System

(內含雙管GoScript™ Reverse Transcription System與GoTaq® Probe qPCR Master Mix.第一步驟先將RNA，加上Reverse transcriptase合成cDNA，於第二步驟進行是Amplification和Quantitation)

Choosing the Right Real-Time qPCR Technology for Your Application